Tisztító berendezés oligo tisztításhoz

1. Gélelektroforézis kromatográfiás tisztítás
Tisztításhoz használjon denaturáló poliakrilamid gélelektroforézis kromatográfiát.A denaturálószer általában 4 M formamid vagy 7 M karbamid, az akrilamid koncentrációja 5-15%, a metakrilamid aránya pedig főként 2-10%.
Az elektroforézis után ultraibolya fény hatására meg kell határozni a nukleinsavsáv helyzetét, a célnukleinsavat tartalmazó gélt le kell vágni, a nukleinsavat összetörni és kilúgozni, majd a kilúgozó oldatot betöményíteni, sótalanítani. számszerűsítve és liofilizálva.

2. DMT-On, HPLC tisztítás
Válassza a DMT-On módot a szintézis során, a nyersterméket centrifugáljuk és szobahőmérsékleten koncentráljuk, hogy az aminolízis után eltávolítsuk a felesleges ammóniát.
Az elválasztást C18 oszlopon végeztük acetonitril és 10%-os trietil-amin-ecetsav (TEAA) eluenssel.Az elúció befejezése után bepároljuk, majd a DMT-csoportot trifluor-ecetsavval eltávolítjuk.A semlegesítés után egyes sókat és kis molekulákat egy levágott csövön keresztül eltávolítanak, majd végül sótalanítják.

Ezzel a módszerrel nagyobb tisztaságú terméket kaphatunk, de figyelni kell a depurináció előfordulására.

3. DMT-Off, HPLC tisztítás
Válassza a DMT-Off-ot a szintézis során, és a nyersterméket centrifugáljuk és szobahőmérsékleten koncentráljuk, hogy eltávolítsuk az ammónia feleslegét az ammonolízis után.
Az elválasztáshoz C18 oszlopot használunk, eluensként acetonitrilt és 10% trietil-amin-ecetsavat tartalmazó vizet használva.Az elválasztás befejezése és mennyiségi meghatározása után az alikvot részeket liofilizáljuk.

Ez a módszer az elválasztás körülményeinek gondos beállítását igényli, és viszonylag tiszta célmolekulákat is nyerhet.