A DNS szintézis alapelve

A kémiai DNS szintézis a szilárd fázisú szintézis stratégián és a foszforamidit kémián alapul.A biológiai DNS-szintézistől eltérően a kémiai DNS-szintézis anyaga a DMT (4,4-dimetoxi-tritil) és a foszforamidittel módosított dezoxi-riboxizid, amint az 1. ábrán látható. A DNS-szintézis szilárd hordozón történik (különbözőOligo szintézis oszlop), azaz CPG (kontrollált pórusú üveg) és PS (polisztirol), és a teljes szintézist egyDNS/RNS szintetizátor, amely a fő berendezésünk, különböző modellekkel rendelkezik, mint például: HY egycsatornás szintetizátor, HY-12, HY-192 stb. szintézis ciklus.Egy tipikus szintézisciklus négy lépésből áll: védőcsoport-eltávolítás, kapcsolás, lezárás és oxidáció (2. ábra).A védőcsoport eltávolítása úgy van beállítva, hogy eltávolítsa a DMT-csoportot a szilárd hordozón vagy az 5'-hidroxil-csoportot az előző nukleozidon, védőcsoport-eltávolító reagensként a 3%-os triklór-ecetsavat diklór-metánban használjuk.Ezután a foszforamidittel módosított dezoxi-riboxisidot aktivátor, azaz 5-etil-tiotetrazol vagy 4,5-dicianoimidazol segítségével hidroxilcsoportba engedtük, így a (III) foszfiter-triészter képződik, és végrehajtottuk a Kapcsolási lépést.Egy lezárási lépést hajtunk végre a nem reagált hidroxilcsoport blokkolására a kapcsolási lépés során, hogy minimalizáljuk a nem kívánt hibaszekvenciák kialakulását.Végül a (III) általános képletű instabil foszfit-triésztert kémiailag stabil foszfotriészterré (V) oxidálják jóddal mint oxidálószerrel a piridin jelenlétében.

A szintetizált DNS aminolízissel lehasítható a szilárd hordozóról, a foszfortriészteren lévő 2-ciano-etil védett csoport és a nukleobázison lévő amid egyszerre hasítható, a rackben lévő szintézislemezek és szintézisoszlopok közvetlenül a reakciókamrába kerülnek. aVédelemtalanító berendezések.Igény szerint a nyers DNS-t HPLC-vel, elektroforézissel és OPC-vel is előállíthatjuk, mi is biztosítjuk ÖnnekTisztító berendezésekutófeldolgozáshoz.